作者wayne841503 (JPG)
看板Biotech
標題[求救] Gel elution測O.D
時間Fri May 4 14:46:02 2012
請問一下~~
一般情況在做完Gel elution後 會去測O.D260/280比值嗎?
還是只看濃度就好???
因為我最近要做ligation
我將我的plasmid先以restriction enzyme切過後
跑膠→Gel elution→做ligation
我是用Qiagen的Gel elution kit
但我發現elution後測O.D 260/280 ratio都超過2
最高還有2X出現 濃度大概都只有30ng/ul左右(跑膠確定有band)
之前用Viogene時 測出來ratio大概都是1.8左右
我想問有沒有人也遇過類似的狀況? 目前做了2批都一樣
感謝> <"
--
◤ ▂◎▅◎▂ ◆
◆ ▲▲ ◥
◢◤◥◥ ◣ ◆
◆ ◢◥◤◥◣ ◣東方project系列
▋＞ ＜◢▋ ◆
◆ ▋◣ ◢ ▍ ￣￣￣￣￣￣￣
▌▄▄▄◤▎ ◆
◆ ◆
◆ ◥◣▄▄▄◢◤ 持續推廣ing
▼| |▼ ◆
◆ ◥ ￣██>◥◤
◣ ▲▆▲ 少女受虐中... ◆
◆ ◤ ▼◥ ψ涼宮 域 gbwind ◢
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.48.124
1F：推 hchs890843:有測過，不過你是用水還是elution buffer把DNA elute? 05/04 21:58
2F：→ hchs890843:因為elution buffer有鹽會干擾OD值，但我覺得對ligate 05/04 21:59
3F：→ hchs890843:影響還好，真正重點還是在V/I ratio跟接點的條件 05/04 21:59
4F：→ wayne841503:用Kit附的elution buffer~ 05/05 03:13
5F：推 windyflyer:我用elution buffer測都約1.6-1.4這種數值 不過還是接 05/05 14:04
6F：→ windyflyer:得進去 05/05 14:05
7F：推 satantaco:會測...但是V牌的member粹屑掉進sample裡會造成假陽性 05/08 23:19
8F：→ satantaco:也就是吸光質數據不錯 但跑膠band不好看 不亮或拖尾 05/08 23:20
9F：→ satantaco:作後續實驗有出過狀況 Q牌相對來說好非常多 回收量多 05/08 23:21
10F：→ satantaco:band也美 但是價錢也很夭壽的美 用多了老闆會靠腰 05/08 23:21