作者wayne841503 (JPG)
看板Biotech
标题[求救] Gel elution测O.D
时间Fri May 4 14:46:02 2012
请问一下~~
一般情况在做完Gel elution後 会去测O.D260/280比值吗?
还是只看浓度就好???
因为我最近要做ligation
我将我的plasmid先以restriction enzyme切过後
跑胶→Gel elution→做ligation
我是用Qiagen的Gel elution kit
但我发现elution後测O.D 260/280 ratio都超过2
最高还有2X出现 浓度大概都只有30ng/ul左右(跑胶确定有band)
之前用Viogene时 测出来ratio大概都是1.8左右
我想问有没有人也遇过类似的状况? 目前做了2批都一样
感谢> <"
--
◤ ▂◎▅◎▂ ◆
◆ ▲▲ ◥
◢◤◥◥ ◣ ◆
◆ ◢◥◤◥◣ ◣东方project系列
▋＞ ＜◢▋ ◆
◆ ▋◣ ◢ ▍ ￣￣￣￣￣￣￣
▌▄▄▄◤▎ ◆
◆ ◆
◆ ◥◣▄▄▄◢◤ 持续推广ing
▼| |▼ ◆
◆ ◥ ￣██>◥◤
◣ ▲▆▲ 少女受虐中... ◆
◆ ◤ ▼◥ ψ凉宫 域 gbwind ◢
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.48.124
1F：推 hchs890843:有测过，不过你是用水还是elution buffer把DNA elute? 05/04 21:58
2F：→ hchs890843:因为elution buffer有盐会干扰OD值，但我觉得对ligate 05/04 21:59
3F：→ hchs890843:影响还好，真正重点还是在V/I ratio跟接点的条件 05/04 21:59
4F：→ wayne841503:用Kit附的elution buffer~ 05/05 03:13
5F：推 windyflyer:我用elution buffer测都约1.6-1.4这种数值 不过还是接 05/05 14:04
6F：→ windyflyer:得进去 05/05 14:05
7F：推 satantaco:会测...但是V牌的member粹屑掉进sample里会造成假阳性 05/08 23:19
8F：→ satantaco:也就是吸光质数据不错 但跑胶band不好看 不亮或拖尾 05/08 23:20
9F：→ satantaco:作後续实验有出过状况 Q牌相对来说好非常多 回收量多 05/08 23:21
10F：→ satantaco:band也美 但是价钱也很夭寿的美 用多了老板会靠腰 05/08 23:21