作者smallwang30 (忙碌也是會寂寞)
看板Biotech
標題[求救] 胎鼠卵巢蠟切達人請進
時間Sat Apr 28 22:45:30 2012
各位板友大家好
我目前的實驗是將胎鼠 (E14.5) 的卵巢 (其實這時還叫做性腺)
經過體外培養後進行蠟切
但是在切片的過程中，片子的波浪狀刀痕 (與刀子平行) 會相當嚴重
也有很多組織切到中間時，整個組織都會被推到旁邊
整個切面就形成洞洞裝...
我是使用 10% formaldehyde in PBS 進行固定
固定時間有試過4度 overnight 以及 RT 3小時處理過
overnight 整個就慘不忍睹，3小時有改善一點，但依然刀痕與破片嚴重
想請教板上有沒有人有類似的經驗可以分享
有沒有必要更改固定條件呢？
麻煩各位大師解答。
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 58.115.37.70
1F：→ GauYi:你刀子用哪一種？ 是新的嗎？ 04/29 07:57
2F：推 goshr:波浪狀, 把所有的關節巡一遍, 可能有哪裡沒鎖緊 04/29 09:55
3F：→ goshr:組織被推到一邊, 可能組織比較韌, 或刀不夠利囉, 換個刀試試 04/29 09:57
4F：→ smallwang30:謝謝各位，我刀子都是新的，而且切其他組織時不會有 04/29 17:04
5F：→ smallwang30:肝腎腦切起來都很ok,之有卵巢會這樣 04/29 17:05
6F：→ smallwang30:有同事建議換固定放方式，但用PFA,bouin都沒改善 04/29 17:09
7F：→ goshr:我切過成鼠的卵巢, 印象中沒什麼問題..不然拿來我試試^^ 04/29 23:59
8F：→ smallwang30:我已經有點無計可施了，如果可以下次取一顆寄給你 04/30 01:41
9F：→ smallwang30:我切成鼠的也是OK，我已經有點無計可施了 04/30 01:41
10F：→ melanoma:可能是蠟塊太軟，放乾冰冷一點再切 05/01 00:28