作者smallwang30 (忙碌也是会寂寞)
看板Biotech
标题[求救] 胎鼠卵巢蜡切达人请进
时间Sat Apr 28 22:45:30 2012
各位板友大家好
我目前的实验是将胎鼠 (E14.5) 的卵巢 (其实这时还叫做性腺)
经过体外培养後进行蜡切
但是在切片的过程中，片子的波浪状刀痕 (与刀子平行) 会相当严重
也有很多组织切到中间时，整个组织都会被推到旁边
整个切面就形成洞洞装...
我是使用 10% formaldehyde in PBS 进行固定
固定时间有试过4度 overnight 以及 RT 3小时处理过
overnight 整个就惨不忍睹，3小时有改善一点，但依然刀痕与破片严重
想请教板上有没有人有类似的经验可以分享
有没有必要更改固定条件呢？
麻烦各位大师解答。
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 58.115.37.70
1F：→ GauYi:你刀子用哪一种？ 是新的吗？ 04/29 07:57
2F：推 goshr:波浪状, 把所有的关节巡一遍, 可能有哪里没锁紧 04/29 09:55
3F：→ goshr:组织被推到一边, 可能组织比较韧, 或刀不够利罗, 换个刀试试 04/29 09:57
4F：→ smallwang30:谢谢各位，我刀子都是新的，而且切其他组织时不会有 04/29 17:04
5F：→ smallwang30:肝肾脑切起来都很ok,之有卵巢会这样 04/29 17:05
6F：→ smallwang30:有同事建议换固定放方式，但用PFA,bouin都没改善 04/29 17:09
7F：→ goshr:我切过成鼠的卵巢, 印象中没什麽问题..不然拿来我试试^^ 04/29 23:59
8F：→ smallwang30:我已经有点无计可施了，如果可以下次取一颗寄给你 04/30 01:41
9F：→ smallwang30:我切成鼠的也是OK，我已经有点无计可施了 04/30 01:41
10F：→ melanoma:可能是蜡块太软，放乾冰冷一点再切 05/01 00:28