作者sylvialalala (sylvia)
看板Biotech
標題[求救] 大家的genomic dna都很容易degrade嗎
時間Wed Apr 4 20:11:23 2012
之前要p genomic dna一直p不出來，後來以新鮮抽dna 的有p出來一次10k
但下一次要做的時候想要做正對照，p出來卻是smear!!!
做法跟前一次完全一樣
唯一想到的就是dna degrade了
可是中間我也才冷凍解凍一次而已.....
請問大家的genomic dna有那麼容易degrade嗎?
另外，第二次我用的是分裝後的dna，有可能是因為分裝不均勻嗎？
(我是用labturbo這套kit抽的，elute在cceb裡面）
謝謝
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◆ From: 61.230.50.234
※ 編輯: sylvialalala 來自: 61.230.50.234 (04/04 20:15)
1F：推 crazybrian:鹽濃度也會影響 可以分批稀釋去P看看 04/04 20:17
2F：推 kenseifan:我之前GENOME DNA放兩年也還很好用 04/04 22:03
3F：推 aggaci:smear-->降低Mg2+濃度超有效! 04/04 22:34
4F：→ sylvialalala:謝謝樓上！！我明天會試試看！！ 04/04 23:17
5F：→ schmitt:.....稀釋10倍看看 04/05 01:22
6F：推 stormcorn:PCR之前DNA要定量跟稀釋 04/05 22:44
7F：→ sylvialalala:今天試過了鎂離子還是p不出來～我dna只有下30 ng而已 04/06 00:15
8F：→ sylvialalala:這樣還要稀釋嗎？ 04/06 00:16
9F：→ WinnieDad:Genomic DNA一般情況來說不是那麼容易degrade，除非存放 04/08 00:25
10F：→ WinnieDad:的buffer有問題。用其它組成功過的primers若還是p不出來 04/08 00:28
11F：→ WinnieDad:，可能就真的是DNA本身發生問題了。你PCR的band是smear 04/08 00:29
12F：→ WinnieDad:還是faint？faint還有救，smear就… 04/08 00:30