作者sylvialalala (sylvia)
看板Biotech
标题[求救] 大家的genomic dna都很容易degrade吗
时间Wed Apr 4 20:11:23 2012
之前要p genomic dna一直p不出来，後来以新鲜抽dna 的有p出来一次10k
但下一次要做的时候想要做正对照，p出来却是smear!!!
做法跟前一次完全一样
唯一想到的就是dna degrade了
可是中间我也才冷冻解冻一次而已.....
请问大家的genomic dna有那麽容易degrade吗?
另外，第二次我用的是分装後的dna，有可能是因为分装不均匀吗？
(我是用labturbo这套kit抽的，elute在cceb里面）
谢谢
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◆ From: 61.230.50.234
※ 编辑: sylvialalala 来自: 61.230.50.234 (04/04 20:15)
1F：推 crazybrian:盐浓度也会影响 可以分批稀释去P看看 04/04 20:17
2F：推 kenseifan:我之前GENOME DNA放两年也还很好用 04/04 22:03
3F：推 aggaci:smear-->降低Mg2+浓度超有效! 04/04 22:34
4F：→ sylvialalala:谢谢楼上！！我明天会试试看！！ 04/04 23:17
5F：→ schmitt:.....稀释10倍看看 04/05 01:22
6F：推 stormcorn:PCR之前DNA要定量跟稀释 04/05 22:44
7F：→ sylvialalala:今天试过了镁离子还是p不出来～我dna只有下30 ng而已 04/06 00:15
8F：→ sylvialalala:这样还要稀释吗？ 04/06 00:16
9F：→ WinnieDad:Genomic DNA一般情况来说不是那麽容易degrade，除非存放 04/08 00:25
10F：→ WinnieDad:的buffer有问题。用其它组成功过的primers若还是p不出来 04/08 00:28
11F：→ WinnieDad:，可能就真的是DNA本身发生问题了。你PCR的band是smear 04/08 00:29
12F：→ WinnieDad:还是faint？faint还有救，smear就… 04/08 00:30