作者iamrim (笨小孩~)
看板Biotech
標題[求救] cloning時primer設計
時間Thu Mar 8 08:31:33 2012
我實驗要把目標基因(insert)接在GFP的後面
也就是說GFP是在tag在N端
我要先用pcr將目標基因p出,旁邊帶有限制脢切位
primer的設計要將目標基因的第一個胺基酸"Met"去除嗎?
還是可以保留Met?
保留後蛋白質應該也是可以從GFP開始做做到我的目標基因嗎?
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 111.255.169.185
1F:推 hangzer:可以去除 有些人怕會影響表現量 所以會把ATG砍掉 不過 03/08 09:07
2F:→ hangzer:我個人經驗式不砍也沒差XD 03/08 09:07
3F:推 HEK293:小心kozak就沒事了。 03/08 09:22
4F:→ iamrim:謝謝樓上大大的回答! 03/11 22:45