作者iamrim (笨小孩~)
看板Biotech
标题[求救] cloning时primer设计
时间Thu Mar 8 08:31:33 2012
我实验要把目标基因(insert)接在GFP的後面
也就是说GFP是在tag在N端
我要先用pcr将目标基因p出,旁边带有限制脢切位
primer的设计要将目标基因的第一个胺基酸"Met"去除吗?
还是可以保留Met?
保留後蛋白质应该也是可以从GFP开始做做到我的目标基因吗?
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◆ From: 111.255.169.185
1F：推 hangzer:可以去除 有些人怕会影响表现量 所以会把ATG砍掉 不过 03/08 09:07
2F：→ hangzer:我个人经验式不砍也没差XD 03/08 09:07
3F：推 HEK293:小心kozak就没事了。 03/08 09:22
4F：→ iamrim:谢谢楼上大大的回答! 03/11 22:45