作者liquidwater (飛得越高是給越多人看)
看板Biotech
標題[閒聊]Glucose與表達蛋白
時間Sat Feb 11 15:51:28 2012
正在用BL21(DE3)表達Glycolysis中的某一個蛋白
加入IPTG後 表達效果很差
是需要加入glucose來抑制細菌去代謝Lac Gal等替代能源
才會使細菌走Glycolysis這條路嗎
謝謝
多年前有做過類似實驗 但現在不太記得細節了
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 114.41.40.192
1F：推 bluecsky:要看你要表達的蛋白是用什麼promoter才是重點吧 02/12 16:56
2F：→ bluecsky:除非你是想用原始promoter 才會因為glucose而誘發表現 02/12 16:57
3F：→ bluecsky:如果你是接在gal promoter上 那就是要用IPTG誘導他了 02/12 16:57
4F：→ bluecsky:而且你也沒說清楚你表達後的目的是?測是否有表達?純化? 02/12 16:58
5F：→ liquidwater:測試表達 接在lac promoter上 02/12 20:32
6F：推 bluecsky:那麼就是要去測試最佳誘導的條件 作各種不同條件去測吧 02/13 00:03
7F：→ bluecsky:一般調整法有調IPTG濃度 時間 溫度 等等 02/13 00:03