作者liquidwater (飞得越高是给越多人看)
看板Biotech
标题[闲聊]Glucose与表达蛋白
时间Sat Feb 11 15:51:28 2012
正在用BL21(DE3)表达Glycolysis中的某一个蛋白
加入IPTG後 表达效果很差
是需要加入glucose来抑制细菌去代谢Lac Gal等替代能源
才会使细菌走Glycolysis这条路吗
谢谢
多年前有做过类似实验 但现在不太记得细节了
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 114.41.40.192
1F:推 bluecsky:要看你要表达的蛋白是用什麽promoter才是重点吧 02/12 16:56
2F:→ bluecsky:除非你是想用原始promoter 才会因为glucose而诱发表现 02/12 16:57
3F:→ bluecsky:如果你是接在gal promoter上 那就是要用IPTG诱导他了 02/12 16:57
4F:→ bluecsky:而且你也没说清楚你表达後的目的是?测是否有表达?纯化? 02/12 16:58
5F:→ liquidwater:测试表达 接在lac promoter上 02/12 20:32
6F:推 bluecsky:那麽就是要去测试最佳诱导的条件 作各种不同条件去测吧 02/13 00:03
7F:→ bluecsky:一般调整法有调IPTG浓度 时间 温度 等等 02/13 00:03