作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
標題[問題] laminar flow抽RNA的缺點
時間Sat Jan 14 22:18:35 2012
之前爬文，很多人提過抽RNA不用在laminar flow內，說抽RNA需要的不是「無菌室」
而是「無塵室」，甚至認為裡面的風一直往下吹，反而有可能增加RNase接觸的機率，
我想請問的是：
1.laminar flow的HEPA+氣流循環無法擋住RNase嗎？
2.如果不是無菌的狀況，會不會有細菌RNA之後被PCR抓出來的可能？尤其是
constant gene之類的？有時細胞量真的不夠，不曉得會不會P到細菌的。
另外，因為實驗室很小，沒法找到旁邊都沒人的角落做實驗，也不可能讓
所有人戴口罩或閉嘴，請問這樣還是不建議在laminar flow內操作嗎？
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太初有道，道與耶和華同在，道就是耶和華。這道太初與耶和華同在。
萬物乃藉祂所造，凡被造的沒有一樣不是藉著祂所造的。生命在祂裡頭，
這生命就是人的光。光照在黑暗裡，黑暗卻不接受光。
吾輩乃生於黑暗，行於黑暗。因神之指引，行向光明；又因撒旦誘惑，回歸黑暗。
我不斷地徘徊於光明與黑暗之間，從被造之日至今，又自今直到那審判之日的來臨。
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◆ From: 180.176.44.154
1F：→ qqmango:2.那個落菌量微乎其微啊，細胞量隨便都至少10^3以上吧 01/14 22:53
2F：推 huuban:我們實驗室也很小很擠，還是可以抽啊 01/14 23:18
3F：→ huuban:不過，因為有用有機溶劑，所以我必須在 hood 操作 01/14 23:18
4F：→ huuban:至於其他用 kit 的人，跟抽plasmid的用具共用也沒有問題 01/14 23:19
5F：推 Rarelay:建議還是用。用之前用 RNaseZAP 擦過，使用時不開風。 01/15 00:21
6F：→ Ianthegood:其實bench上就ok耶 冰上自己小心就好 有機還是要進hood 01/15 01:14
7F：推 dodomilk:你就戴好手套口罩，在bench上好好抽一次RNA 01/15 01:14
8F：→ dodomilk:如果不會降解的話，以後就在bench上抽就好了 01/15 01:15
9F：→ dodomilk:我大概也用TRIzol抽了幾十次RNA，都在bench上也沒事啊 01/15 01:15
10F：推 aggaci:氯仿會揮發 在hood內做! 01/15 02:16
11F：推 Realthugz:我們有一個無循環的櫃子抽 或許你可以關掉blower 01/15 02:48
12F：推 nixo:現在有不用氯仿的RNAzol，應該有幫助 01/15 02:59
13F：推 Rarelay:RNAzol 推薦 +1 01/15 13:42
14F：→ LIAR:flow是往下吹，hood是往上吸，哪種比較好啊？我學長是點兩瓶 01/15 22:07
15F：→ LIAR:酒精燈操作的，說熱氣流可以避免上方髒東西掉入... 01/15 22:08
16F：推 leoblack:在專門做RNA的lab待過一陣子,直接在bench上操作就夠了~ 01/15 22:19
17F：→ leoblack:手套跟口罩隨時帶著,就夠了~ 01/15 22:19
18F：→ huuban:RNAzol很貴啊，而且對植物實在沒輒 01/15 22:24
19F：→ huuban:就算沒有氯仿，光是reagent本身就有揮發性的有機溶劑啊 01/15 22:25
20F：→ huuban:戴個口罩保護樣本也稍微保護自己，在hood是保護大家 01/15 22:25
21F：推 aceliang:氣流向下的應該是生物安全櫃，化學排氣櫃氣流向上哪~ 01/15 23:46
22F：→ aceliang:TRIZol裡面有phenol，後來又要加哥羅芳，所以才在排氣櫃 01/15 23:47
23F：→ aceliang:不然我都在路邊亂抽，動作快點就也還好。 01/15 23:48
24F：→ LIAR:我那點酒精燈的學長倒真的是在路邊抽就是了，當然還是會叫我 01/16 00:06
25F：→ LIAR:們離遠一點，還有別亂嘴砲XD。 01/16 00:07
26F：→ LIAR:不過現在這個實驗室人擠來擠去，要清場很困難。 01/16 00:08
27F：推 HEK293:動作快是唯一的準則。快˙狠˙準！ 01/16 09:08
28F：推 huuban:可是有有機溶劑還用酒精燈也太刺激了 xDD 01/16 17:19
29F：→ hensu:Trizol和chloroform都很毒...本來protocol就寫在hood做... 01/17 16:21
30F：→ LIAR:可是我們家的hood很髒啊，離離心機又遠，囧 01/21 23:11
31F：推 mayjasty:我們實驗室定期用0.1%DEPC噴flow 01/21 23:19
32F：→ LIAR:樓上！是用沒高溫滅菌的噴？ 01/22 00:07
33F：推 aceliang:DEPC有毒的說... 01/22 13:08
34F：推 hahacc:DEPC....你們實驗室....讚喔!! 百毒不侵@@ 01/22 14:27
35F：→ huuban:DEPC..超毒的啊..你哪間實驗室..大家離遠些..!!! 01/23 01:20
36F：→ LIAR:之前爬文就有看到一篇老闆堅持要用DEPC清洗不能高溫滅菌器材 01/23 08:37
37F：→ LIAR:的實驗室，不曉得mayjasty是不是同一間？ 01/23 08:38