作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
标题[问题] laminar flow抽RNA的缺点
时间Sat Jan 14 22:18:35 2012
之前爬文，很多人提过抽RNA不用在laminar flow内，说抽RNA需要的不是「无菌室」
而是「无尘室」，甚至认为里面的风一直往下吹，反而有可能增加RNase接触的机率，
我想请问的是：
1.laminar flow的HEPA+气流循环无法挡住RNase吗？
2.如果不是无菌的状况，会不会有细菌RNA之後被PCR抓出来的可能？尤其是
constant gene之类的？有时细胞量真的不够，不晓得会不会P到细菌的。
另外，因为实验室很小，没法找到旁边都没人的角落做实验，也不可能让
所有人戴口罩或闭嘴，请问这样还是不建议在laminar flow内操作吗？
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太初有道，道与耶和华同在，道就是耶和华。这道太初与耶和华同在。
万物乃藉祂所造，凡被造的没有一样不是藉着祂所造的。生命在祂里头，
这生命就是人的光。光照在黑暗里，黑暗却不接受光。
吾辈乃生於黑暗，行於黑暗。因神之指引，行向光明；又因撒旦诱惑，回归黑暗。
我不断地徘徊於光明与黑暗之间，从被造之日至今，又自今直到那审判之日的来临。
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◆ From: 180.176.44.154
1F：→ qqmango:2.那个落菌量微乎其微啊，细胞量随便都至少10^3以上吧 01/14 22:53
2F：推 huuban:我们实验室也很小很挤，还是可以抽啊 01/14 23:18
3F：→ huuban:不过，因为有用有机溶剂，所以我必须在 hood 操作 01/14 23:18
4F：→ huuban:至於其他用 kit 的人，跟抽plasmid的用具共用也没有问题 01/14 23:19
5F：推 Rarelay:建议还是用。用之前用 RNaseZAP 擦过，使用时不开风。 01/15 00:21
6F：→ Ianthegood:其实bench上就ok耶 冰上自己小心就好 有机还是要进hood 01/15 01:14
7F：推 dodomilk:你就戴好手套口罩，在bench上好好抽一次RNA 01/15 01:14
8F：→ dodomilk:如果不会降解的话，以後就在bench上抽就好了 01/15 01:15
9F：→ dodomilk:我大概也用TRIzol抽了几十次RNA，都在bench上也没事啊 01/15 01:15
10F：推 aggaci:氯仿会挥发 在hood内做! 01/15 02:16
11F：推 Realthugz:我们有一个无循环的柜子抽 或许你可以关掉blower 01/15 02:48
12F：推 nixo:现在有不用氯仿的RNAzol，应该有帮助 01/15 02:59
13F：推 Rarelay:RNAzol 推荐 +1 01/15 13:42
14F：→ LIAR:flow是往下吹，hood是往上吸，哪种比较好啊？我学长是点两瓶 01/15 22:07
15F：→ LIAR:酒精灯操作的，说热气流可以避免上方脏东西掉入... 01/15 22:08
16F：推 leoblack:在专门做RNA的lab待过一阵子,直接在bench上操作就够了~ 01/15 22:19
17F：→ leoblack:手套跟口罩随时带着,就够了~ 01/15 22:19
18F：→ huuban:RNAzol很贵啊，而且对植物实在没辄 01/15 22:24
19F：→ huuban:就算没有氯仿，光是reagent本身就有挥发性的有机溶剂啊 01/15 22:25
20F：→ huuban:戴个口罩保护样本也稍微保护自己，在hood是保护大家 01/15 22:25
21F：推 aceliang:气流向下的应该是生物安全柜，化学排气柜气流向上哪~ 01/15 23:46
22F：→ aceliang:TRIZol里面有phenol，後来又要加哥罗芳，所以才在排气柜 01/15 23:47
23F：→ aceliang:不然我都在路边乱抽，动作快点就也还好。 01/15 23:48
24F：→ LIAR:我那点酒精灯的学长倒真的是在路边抽就是了，当然还是会叫我 01/16 00:06
25F：→ LIAR:们离远一点，还有别乱嘴炮XD。 01/16 00:07
26F：→ LIAR:不过现在这个实验室人挤来挤去，要清场很困难。 01/16 00:08
27F：推 HEK293:动作快是唯一的准则。快˙狠˙准！ 01/16 09:08
28F：推 huuban:可是有有机溶剂还用酒精灯也太刺激了 xDD 01/16 17:19
29F：→ hensu:Trizol和chloroform都很毒...本来protocol就写在hood做... 01/17 16:21
30F：→ LIAR:可是我们家的hood很脏啊，离离心机又远，囧 01/21 23:11
31F：推 mayjasty:我们实验室定期用0.1%DEPC喷flow 01/21 23:19
32F：→ LIAR:楼上！是用没高温灭菌的喷？ 01/22 00:07
33F：推 aceliang:DEPC有毒的说... 01/22 13:08
34F：推 hahacc:DEPC....你们实验室....赞喔!! 百毒不侵@@ 01/22 14:27
35F：→ huuban:DEPC..超毒的啊..你哪间实验室..大家离远些..!!! 01/23 01:20
36F：→ LIAR:之前爬文就有看到一篇老板坚持要用DEPC清洗不能高温灭菌器材 01/23 08:37
37F：→ LIAR:的实验室，不晓得mayjasty是不是同一间？ 01/23 08:38