大家好 我最近都在做坐骨神經組織的石蠟切片 但是一直遇到一個很大的問題 就是無法保持組織型態的完整 切出來每一片幾乎不是變形就是有破洞 我看過一些教材的切片也是有些微的破碎或變形 如果稍微變形或破碎都還可以接受 但我切出來的實在都太嚴重 整個nerve bundle會跟perineurium分離 nerve fiber也常常會分開或是像被什麼拉長一樣的變形 我目前用的方法如下： sample切成3~5mm小段之後固定 固定液：Paraformaldehyde 24 hrs 後固定兼染myelin：Osmium Tetroxide 1 hr 梯度酒精脫水與置換包埋按一般步驟 (酒精50%→→→100%，酒精與xylene混合，xylene，xylene與石蠟混合，石蠟) 染色是用HE 我在想是否是固定太久或是固定不足 還是石蠟置換的不完全造成的@@ 切片的時候勤於換刀是有稍微好一點 但也只有稍微@@ 石蠟切片這部份 我之前切過軟硬骨、卵巢、皮膚都沒有太大的問題 唯獨這次神經真是讓我嚐到苦頭 感覺很挫敗...Orz 我知道改冷切或許是個好方法 但礙於現狀無法改用冷切..@@ 不知道各位有沒有什麼建議可以改善這種狀況? 謝謝～ --

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