大家好 我最近都在做坐骨神经组织的石蜡切片 但是一直遇到一个很大的问题 就是无法保持组织型态的完整 切出来每一片几乎不是变形就是有破洞 我看过一些教材的切片也是有些微的破碎或变形 如果稍微变形或破碎都还可以接受 但我切出来的实在都太严重 整个nerve bundle会跟perineurium分离 nerve fiber也常常会分开或是像被什麽拉长一样的变形 我目前用的方法如下： sample切成3~5mm小段之後固定 固定液：Paraformaldehyde 24 hrs 後固定兼染myelin：Osmium Tetroxide 1 hr 梯度酒精脱水与置换包埋按一般步骤 (酒精50%→→→100%，酒精与xylene混合，xylene，xylene与石蜡混合，石蜡) 染色是用HE 我在想是否是固定太久或是固定不足 还是石蜡置换的不完全造成的@@ 切片的时候勤於换刀是有稍微好一点 但也只有稍微@@ 石蜡切片这部份 我之前切过软硬骨、卵巢、皮肤都没有太大的问题 唯独这次神经真是让我嚐到苦头 感觉很挫败...Orz 我知道改冷切或许是个好方法 但碍於现状无法改用冷切..@@ 不知道各位有没有什麽建议可以改善这种状况? 谢谢～ --

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