作者diamondcrazy ()
看板Biotech
標題Re: [求救] transwell染色
時間Wed Dec 21 11:39:13 2011
請問板友們你們固定細胞時間是多久呢?
我用95%的methonal固定10分鐘,transwell內外都加,
可是依照我seeding的細胞數,每次染色結果感覺都不一樣
看起來好像是沒固定好wash時被我洗掉了...囧
我的protocol是 95%methonal固定10min
去除methonal風乾5min
加入8% crystal violet染色1hr
H20 wash,做法是先將transwell內加滿水,然後浸入放水的燒杯裡搖晃
再用pipet把水吸乾
是我的wash步驟太粗魯把細胞沖掉了嗎,能否問問有做過的前輩是怎麼洗的嗎?謝謝
※ 引述《diamondcrazy ()》之銘言：
: 如題
: 有板友做過將transwell拿來染色的實驗嗎?
: 請問能否用methanol固定後做giemsa或HE染色?有人有做過嗎
: 在paper上有看到幾篇有這樣的介紹,不過想跟有做過的板友討論一下
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◆ From: 140.112.133.236
1F：推 warmheaven:我都是固定完用棉花棒擦transwell內部之後看顯微鏡 01/02 18:02
2F：→ warmheaven:看有沒有把細胞給擦掉在染色 給你參考一下 01/02 18:03
3F：推 saiwilly:我也是細胞掉超多的 根本無法比較 01/27 01:39