作者diamondcrazy ()
看板Biotech
标题Re: [求救] transwell染色
时间Wed Dec 21 11:39:13 2011
请问板友们你们固定细胞时间是多久呢?
我用95%的methonal固定10分钟,transwell内外都加,
可是依照我seeding的细胞数,每次染色结果感觉都不一样
看起来好像是没固定好wash时被我洗掉了...囧
我的protocol是 95%methonal固定10min
去除methonal风乾5min
加入8% crystal violet染色1hr
H20 wash,做法是先将transwell内加满水,然後浸入放水的烧杯里摇晃
再用pipet把水吸乾
是我的wash步骤太粗鲁把细胞冲掉了吗,能否问问有做过的前辈是怎麽洗的吗?谢谢
※ 引述《diamondcrazy ()》之铭言：
: 如题
: 有板友做过将transwell拿来染色的实验吗?
: 请问能否用methanol固定後做giemsa或HE染色?有人有做过吗
: 在paper上有看到几篇有这样的介绍,不过想跟有做过的板友讨论一下
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◆ From: 140.112.133.236
1F：推 warmheaven:我都是固定完用棉花棒擦transwell内部之後看显微镜 01/02 18:02
2F：→ warmheaven:看有没有把细胞给擦掉在染色 给你参考一下 01/02 18:03
3F：推 saiwilly:我也是细胞掉超多的 根本无法比较 01/27 01:39