作者snowwalker (鳥龍綠半糖少冰)
看板Biotech
標題[求救] Bradford蛋白質定量
時間Fri Dec 16 17:34:56 2011
事情是這樣的
我們家的lysis buffer跟sample buffer的配方皆為
Tris-HCl（pH6.8） 100 mM
Dithiothreitol（DTT） 200 mM（P.S 要用時才加入）
SDS 4 ％
Glycerol 20 ％
不過之前沒有注意到裡面的SDS濃度為4%
所以買了Bradford protein assay
請問大家有任何改進的方法呢?
降低SDS濃度有無影響呢?
或者有無任何SDS的替代品可用
謝謝
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◆ From: 203.71.94.11
1F：推 martyrtitan:稀釋後看和ddH2O吸光值差多少吧 12/16 17:43
2F：→ martyrtitan:我用7M urea 2M thio-urea 還有0.005%BPB 稀釋50x 12/16 17:44
3F：→ martyrtitan:和水的吸光沒差 12/16 17:45
4F：→ even2300471:測吸光值用Beer's law換算蛋白質濃度 12/16 17:57
5F：→ snowwalker:比較好奇的是檢量線也是要用sample buffer去配嗎? 12/16 18:04
6F：→ snowwalker:還是用ddH2O去配就好了?另外用96well的線性範圍是? 12/16 18:04
7F：推 martyrtitan:STD用水就好 變成Sample減去lysis(稀釋的) STD減水 12/19 01:02