作者snowwalker (鸟龙绿半糖少冰)
看板Biotech
标题[求救] Bradford蛋白质定量
时间Fri Dec 16 17:34:56 2011
事情是这样的
我们家的lysis buffer跟sample buffer的配方皆为
Tris-HCl(pH6.8) 100 mM
Dithiothreitol(DTT) 200 mM(P.S 要用时才加入)
SDS 4 %
Glycerol 20 %
不过之前没有注意到里面的SDS浓度为4%
所以买了Bradford protein assay
请问大家有任何改进的方法呢?
降低SDS浓度有无影响呢?
或者有无任何SDS的替代品可用
谢谢
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◆ From: 203.71.94.11
1F:推 martyrtitan:稀释後看和ddH2O吸光值差多少吧 12/16 17:43
2F:→ martyrtitan:我用7M urea 2M thio-urea 还有0.005%BPB 稀释50x 12/16 17:44
3F:→ martyrtitan:和水的吸光没差 12/16 17:45
4F:→ even2300471:测吸光值用Beer's law换算蛋白质浓度 12/16 17:57
5F:→ snowwalker:比较好奇的是检量线也是要用sample buffer去配吗? 12/16 18:04
6F:→ snowwalker:还是用ddH2O去配就好了?另外用96well的线性范围是? 12/16 18:04
7F:推 martyrtitan:STD用水就好 变成Sample减去lysis(稀释的) STD减水 12/19 01:02