作者haoyiw ((???))
看板Biotech
標題[求救] western 求救
時間Tue Nov 29 14:05:49 2011
我最近做western發生了一些問題
1.壓出來感覺有很多條band 雖然從marker來對是可以得到我要的band
2.感覺band中間都出現破洞 然後都集中在兩側 而且顏色太淡 但怕配太濃染到其他東西
3.配膠的時候感覺有點壓不下來
不知道是甚麼原因
我所使用的抗體是COX-2 1:2000 (Santa Cruz)
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◆ From: 163.25.91.69
1F：推 johanjohan:第三點是甚麼意思??? 11/29 16:27
2F：推 chun770526:第一點是二抗沒wash乾淨吧... 11/29 18:58
3F：→ chun770526:第三點會是...sample跑不太下來嗎??? 11/29 18:58
4F：→ yaprint:我猜他是指STACKING吧 11/30 00:53
5F：→ haoyiw:以前配下層膠的時候用酒精壓覺的高度下降很多 11/30 01:27
6F：→ haoyiw:但是現在在上面加酒精好像沒甚麼作用 就直接凝結 11/30 01:27
7F：→ haoyiw:是不是acrylamide壞掉了!! 11/30 01:28
8F：→ blence:acrylamide壞掉還會凝結嗎？ 以前降很多應該是膠液漏掉了 11/30 11:14
9F：→ qiuqiuever:第一點應該是一抗壓太久 12/06 22:49
10F：→ qiuqiuever:第二點band中間有破洞,有可能是在轉漬的時候,膠跟膜中 12/06 22:50
11F：→ qiuqiuever:中間有氣泡 12/06 22:50