作者haoyiw ((???))
看板Biotech
标题[求救] western 求救
时间Tue Nov 29 14:05:49 2011
我最近做western发生了一些问题
1.压出来感觉有很多条band 虽然从marker来对是可以得到我要的band
2.感觉band中间都出现破洞 然後都集中在两侧 而且颜色太淡 但怕配太浓染到其他东西
3.配胶的时候感觉有点压不下来
不知道是甚麽原因
我所使用的抗体是COX-2 1:2000 (Santa Cruz)
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◆ From: 163.25.91.69
1F:推 johanjohan:第三点是甚麽意思??? 11/29 16:27
2F:推 chun770526:第一点是二抗没wash乾净吧... 11/29 18:58
3F:→ chun770526:第三点会是...sample跑不太下来吗??? 11/29 18:58
4F:→ yaprint:我猜他是指STACKING吧 11/30 00:53
5F:→ haoyiw:以前配下层胶的时候用酒精压觉的高度下降很多 11/30 01:27
6F:→ haoyiw:但是现在在上面加酒精好像没甚麽作用 就直接凝结 11/30 01:27
7F:→ haoyiw:是不是acrylamide坏掉了!! 11/30 01:28
8F:→ blence:acrylamide坏掉还会凝结吗? 以前降很多应该是胶液漏掉了 11/30 11:14
9F:→ qiuqiuever:第一点应该是一抗压太久 12/06 22:49
10F:→ qiuqiuever:第二点band中间有破洞,有可能是在转渍的时候,胶跟膜中 12/06 22:50
11F:→ qiuqiuever:中间有气泡 12/06 22:50