作者lier1986 (紫)
看板Biotech
標題[討論]DNA ligation時 260/280的值重要嗎?
時間Thu Nov 24 20:57:52 2011
如題
我做cloning一直做不出來
我認為最大的原因應該在ligation的部分
有看到一些protocol說 ligation前 最好先將sample做clean up的動作
所以我想問
DNA的純度會影響到ligation的效果嗎?
260/280 的值低於1.8就不能做ligation?
那260/230的值也要考慮進去嗎?
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◆ From: 140.122.198.26
1F：推 dodomilk:純度會影響，ligation的條件需求蠻嚴格的 11/24 21:09
2F：→ dodomilk:不過我看過的case中，通常是enzyme沒切好才接不起來 11/24 21:10
3F：→ dodomilk:260/280也會受到DNA濃度影響，我只當作參考 11/24 21:12
4F：推 Realthugz:切完 P完 ligation前 都會clean up阿 所以你都沒做? 11/24 22:43
5F：推 wensing:額外 添加 新的 ATP 11/25 10:45
6F：→ lier1986:clean up是都有做的 只是 我做完之後 看260/280的值 11/25 16:26
7F：→ lier1986:好像沒有到很標準的程度 所以才會問 是不是DNA的品質 11/25 16:26
8F：→ lier1986:不夠好會影響到ligation的結果 11/25 16:27