作者lier1986 (紫)
看板Biotech
标题[讨论]DNA ligation时 260/280的值重要吗?
时间Thu Nov 24 20:57:52 2011
如题
我做cloning一直做不出来
我认为最大的原因应该在ligation的部分
有看到一些protocol说 ligation前 最好先将sample做clean up的动作
所以我想问
DNA的纯度会影响到ligation的效果吗?
260/280 的值低於1.8就不能做ligation?
那260/230的值也要考虑进去吗?
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◆ From: 140.122.198.26
1F：推 dodomilk:纯度会影响，ligation的条件需求蛮严格的 11/24 21:09
2F：→ dodomilk:不过我看过的case中，通常是enzyme没切好才接不起来 11/24 21:10
3F：→ dodomilk:260/280也会受到DNA浓度影响，我只当作参考 11/24 21:12
4F：推 Realthugz:切完 P完 ligation前 都会clean up阿 所以你都没做? 11/24 22:43
5F：推 wensing:额外 添加 新的 ATP 11/25 10:45
6F：→ lier1986:clean up是都有做的 只是 我做完之後 看260/280的值 11/25 16:26
7F：→ lier1986:好像没有到很标准的程度 所以才会问 是不是DNA的品质 11/25 16:26
8F：→ lier1986:不够好会影响到ligation的结果 11/25 16:27