作者jihher (jihher)
看板Biotech
標題[求救] 生醫材料取細胞RNA方法的問題
時間Tue Nov 22 11:20:51 2011
大家好,
我們實驗室是做生醫材料, 目前做到qPCR部分
我的實驗室生醫材料collagen內種細胞, 厚度5mm 大
想請問的是
一般取RNA都是 先把組織或生醫材料 用homogenizer或其他方法 搗碎
然後加入TRIZOL 做RNA extraction接下來的部分
我們老師提到用Proteinase K 這個東西去溶我的材料, 2小時
然後離心取細胞
請問這方法可行嗎, 會不會影響RNA ??
感謝!!
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
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◆ From: 140.114.51.248
※ 編輯: jihher 來自: 140.114.51.248 (11/22 11:21)
1F：推 boblu:PK 本身不會 11/22 11:38
2F：→ jihher:所以此方法是可行的? 11/22 12:18
3F：→ untilnow:不過這樣子和你的treatment環境會有差 11/22 15:13
4F：→ jihher:樓上指的是?? 後續取RNA的方法會跟TRIZOL的有差? 11/22 15:43
5F：推 captdavince:因為你的細胞也被PK treat到了..可能會被argue影響? 11/22 16:37
6F：推 APPswe:Proteinase K要在50度作用2小時 RNA恐怕會degrade了 11/22 21:42
7F：→ untilnow:假設你加藥二小時後收， 但你加了protease後要再兩小時 11/22 21:59
8F：→ untilnow:時間點就會有差異 RNA的表現也不一定是2小時後的表現了 11/22 21:59
9F：推 boblu:樓上正解 PK 本身不會影響 RNA 但是處理的過程時間與問度的 11/22 23:21
10F：→ boblu:"溫度"的影響就難說 11/22 23:21