作者jihher (jihher)
看板Biotech
标题[求救] 生医材料取细胞RNA方法的问题
时间Tue Nov 22 11:20:51 2011
大家好,
我们实验室是做生医材料, 目前做到qPCR部分
我的实验室生医材料collagen内种细胞, 厚度5mm 大
想请问的是
一般取RNA都是 先把组织或生医材料 用homogenizer或其他方法 捣碎
然後加入TRIZOL 做RNA extraction接下来的部分
我们老师提到用Proteinase K 这个东西去溶我的材料, 2小时
然後离心取细胞
请问这方法可行吗, 会不会影响RNA ??
感谢!!
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
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◆ From: 140.114.51.248
※ 编辑: jihher 来自: 140.114.51.248 (11/22 11:21)
1F：推 boblu:PK 本身不会 11/22 11:38
2F：→ jihher:所以此方法是可行的? 11/22 12:18
3F：→ untilnow:不过这样子和你的treatment环境会有差 11/22 15:13
4F：→ jihher:楼上指的是?? 後续取RNA的方法会跟TRIZOL的有差? 11/22 15:43
5F：推 captdavince:因为你的细胞也被PK treat到了..可能会被argue影响? 11/22 16:37
6F：推 APPswe:Proteinase K要在50度作用2小时 RNA恐怕会degrade了 11/22 21:42
7F：→ untilnow:假设你加药二小时後收， 但你加了protease後要再两小时 11/22 21:59
8F：→ untilnow:时间点就会有差异 RNA的表现也不一定是2小时後的表现了 11/22 21:59
9F：推 boblu:楼上正解 PK 本身不会影响 RNA 但是处理的过程时间与问度的 11/22 23:21
10F：→ boblu:"温度"的影响就难说 11/22 23:21