作者poiuy1202 (阿ken)
看板Biotech
標題[求救] 冷凍切片請教
時間Mon Nov 21 14:32:39 2011
各位大大好
小弟是初次做冷凍切片
最近有做一批大鼠皮膚切片用HE染切片厚度10um
切片的時候捲片很嚴重，而且片子常常破掉
切出來組織超級破碎的
我列出我實驗的步驟請各位多多指導一下
1. 切下來的組織直接用OCT包埋(-20度)
2. 泡水去除OCT
3. 浸泡Moyer's Hematoxylin 2分鐘。
4. 置於清水中水洗5至10分鐘。
5. 置入Eosin Y溶液10秒鐘。
依序浸於50 %、70 %、85 %、95 %、100 %的酒精中脫水，最後浸入
二甲苯溶液3至5分鐘後，以固定膠（Xylene Substitute Mountant)封片。
小弟並不是生物背景
所以第一次做這個很吃力
請各位大大指教
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◆ From: 140.135.98.169
1F：→ goshr:Eosin之後用50%的酒精, 可能會把Eosin的顏色褪掉不少喔 11/21 16:56
2F：推 shokyora:包埋時建議把皮毛充分抹滿OCT 另外我是會把皮對折包進去 11/21 19:02
3F：→ shokyora:這樣一片裡能看的地方會比較多也比較好切 10um更好切 11/21 19:04
4F：→ shokyora:反正重點就是OCT要填滿空隙 這樣就不會捲&破了 (我的情況 11/21 19:06
5F：→ vandia:嗯?組織完全不用固定就直接切? 11/21 23:20