作者poiuy1202 (阿ken)
看板Biotech
标题[求救] 冷冻切片请教
时间Mon Nov 21 14:32:39 2011
各位大大好
小弟是初次做冷冻切片
最近有做一批大鼠皮肤切片用HE染切片厚度10um
切片的时候卷片很严重，而且片子常常破掉
切出来组织超级破碎的
我列出我实验的步骤请各位多多指导一下
1. 切下来的组织直接用OCT包埋(-20度)
2. 泡水去除OCT
3. 浸泡Moyer's Hematoxylin 2分钟。
4. 置於清水中水洗5至10分钟。
5. 置入Eosin Y溶液10秒钟。
依序浸於50 %、70 %、85 %、95 %、100 %的酒精中脱水，最後浸入
二甲苯溶液3至5分钟後，以固定胶（Xylene Substitute Mountant)封片。
小弟并不是生物背景
所以第一次做这个很吃力
请各位大大指教
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.135.98.169
1F：→ goshr:Eosin之後用50%的酒精, 可能会把Eosin的颜色褪掉不少喔 11/21 16:56
2F：推 shokyora:包埋时建议把皮毛充分抹满OCT 另外我是会把皮对折包进去 11/21 19:02
3F：→ shokyora:这样一片里能看的地方会比较多也比较好切 10um更好切 11/21 19:04
4F：→ shokyora:反正重点就是OCT要填满空隙 这样就不会卷&破了 (我的情况 11/21 19:06
5F：→ vandia:嗯?组织完全不用固定就直接切? 11/21 23:20