作者FireHell (冥煌 = 好硬)
看板Biotech
標題[求救] 如何維持medium的pH值？
時間Sat Nov 12 21:08:16 2011
我發現我的sample必須要在接近中性環境下才會有作用
因此希望下sample時DMEM的pH≒7.0 (之後在incubator內的變化可忽略)
不過medium在冰箱中總是會越放越鹼 (越來越紅)
有想過每次使用前調pH值，可是pH儀那根本身就是污染源了
也因為含有2% FBS，不能調好後再以0.22過濾 (會有很多protein loss)
除非我大量分裝，例如每瓶才25 mL medium
才能在每次使用前以「調pH --> 0.22過濾 --> 加FBS」處理
(我知道過濾會上升0.1~0.2，這沒關係還在可接受範圍)
但是這樣實在是太麻煩了......想請問各位有沒有方法
可以確保我在下sample時medium的pH≒7.0
感激不盡 :)
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.218.89
1F：推 pwl:瓶口封parafilm會比較好嗎？避免CO2跑掉 11/12 22:08
2F：推 Rarelay:每次濾最好。用針跟小飛碟濾個一週用量。 11/12 22:15
3F：→ g010377:medium加HEPES 可以避免pH變動太大 配好大量之後分裝小量 11/13 00:12
4F：→ g010377:避免重複warm up和4度C 11/13 00:13
5F：→ FireHell:請問樓上HEPES和NaHC03的濃度分別是？感謝回答 :) 11/13 14:45
※ 編輯: FireHell 來自: 140.112.218.89 (11/14 02:09)
6F：→ icome:HEPES +1 我試過可以撐比較久 濃度是25mM 11/14 20:15
7F：推 captdavince:一般來說。.medium的buffer range應該都在7.2~7.4吧 11/15 08:08
8F：→ captdavince:我們做的方式是你用25T flask.放進你的medium.. 11/15 08:08
9F：→ captdavince:直立放到incubator裡讓它equilibrate. 11/15 08:09
10F：→ captdavince:但是有FBS的不要放太久(1week top)..要不然會變性. 11/15 08:09