作者FireHell (冥煌 = 好硬)
看板Biotech
标题[求救] 如何维持medium的pH值？
时间Sat Nov 12 21:08:16 2011
我发现我的sample必须要在接近中性环境下才会有作用
因此希望下sample时DMEM的pH≒7.0 (之後在incubator内的变化可忽略)
不过medium在冰箱中总是会越放越硷 (越来越红)
有想过每次使用前调pH值，可是pH仪那根本身就是污染源了
也因为含有2% FBS，不能调好後再以0.22过滤 (会有很多protein loss)
除非我大量分装，例如每瓶才25 mL medium
才能在每次使用前以「调pH --> 0.22过滤 --> 加FBS」处理
(我知道过滤会上升0.1~0.2，这没关系还在可接受范围)
但是这样实在是太麻烦了......想请问各位有没有方法
可以确保我在下sample时medium的pH≒7.0
感激不尽 :)
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.218.89
1F：推 pwl:瓶口封parafilm会比较好吗？避免CO2跑掉 11/12 22:08
2F：推 Rarelay:每次滤最好。用针跟小飞碟滤个一周用量。 11/12 22:15
3F：→ g010377:medium加HEPES 可以避免pH变动太大 配好大量之後分装小量 11/13 00:12
4F：→ g010377:避免重复warm up和4度C 11/13 00:13
5F：→ FireHell:请问楼上HEPES和NaHC03的浓度分别是？感谢回答 :) 11/13 14:45
※ 编辑: FireHell 来自: 140.112.218.89 (11/14 02:09)
6F：→ icome:HEPES +1 我试过可以撑比较久 浓度是25mM 11/14 20:15
7F：推 captdavince:一般来说。.medium的buffer range应该都在7.2~7.4吧 11/15 08:08
8F：→ captdavince:我们做的方式是你用25T flask.放进你的medium.. 11/15 08:08
9F：→ captdavince:直立放到incubator里让它equilibrate. 11/15 08:09
10F：→ captdavince:但是有FBS的不要放太久(1week top)..要不然会变性. 11/15 08:09