作者twoseeds (Twoseeds)
看板Biotech
標題[討論] 3'RACE一定要用kit才可以做的出來嗎?
時間Wed Oct 26 20:54:18 2011
目前要釣一個基因,因為目標植物很冷門,先找一堆不同植物的基因序列比對
發現有一段片段保守性很高,
在想說可不可以直接設計Gene Specific Primer和OligodT直接PCR捉出基因呢?
因為RACE的藥品好貴啊!做一個reaction要3500元左右,要釣的基因又多
想說3'RACE可用其它替代方案,5'RACE再用kit就好
請問各位先進有沒有一些建議呢?感謝!
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◆ From: 219.69.67.217
1F:推 huuban:Kit 有adaptor,會提高專一性 10/26 23:19
2F:→ huuban:adaptor也可以自己做,但要發表的時候還是要買Kit @@ 10/26 23:20
3F:→ huuban:不然會有專利問題..!!! 10/26 23:20
4F:→ huuban:你說的方法我沒有試過,我們是買了Kit用完後就自己做這樣 10/26 23:21
5F:推 Ianthegood:當然可以用dT做阿 10/27 00:39
6F:→ twoseeds:感謝回應!有機會我試看看,那5'RACE也可以自已做? 10/27 21:13
7F:→ twoseeds:那Taq 就用一般的Taq就可以了嗎?這樣好像很省錢內! 10/27 21:13
8F:→ Ianthegood:5'沒有dT給你做阿 race是在這個時候才好用 10/28 01:10
9F:→ Ianthegood:還有是要放大total cDNA的時候兩邊都有adaptor比較方便 10/28 01:11