作者twoseeds (Twoseeds)
看板Biotech
标题[讨论] 3'RACE一定要用kit才可以做的出来吗?
时间Wed Oct 26 20:54:18 2011
目前要钓一个基因,因为目标植物很冷门,先找一堆不同植物的基因序列比对
发现有一段片段保守性很高,
在想说可不可以直接设计Gene Specific Primer和OligodT直接PCR捉出基因呢?
因为RACE的药品好贵啊!做一个reaction要3500元左右,要钓的基因又多
想说3'RACE可用其它替代方案,5'RACE再用kit就好
请问各位先进有没有一些建议呢?感谢!
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◆ From: 219.69.67.217
1F:推 huuban:Kit 有adaptor,会提高专一性 10/26 23:19
2F:→ huuban:adaptor也可以自己做,但要发表的时候还是要买Kit @@ 10/26 23:20
3F:→ huuban:不然会有专利问题..!!! 10/26 23:20
4F:→ huuban:你说的方法我没有试过,我们是买了Kit用完後就自己做这样 10/26 23:21
5F:推 Ianthegood:当然可以用dT做阿 10/27 00:39
6F:→ twoseeds:感谢回应!有机会我试看看,那5'RACE也可以自已做? 10/27 21:13
7F:→ twoseeds:那Taq 就用一般的Taq就可以了吗?这样好像很省钱内! 10/27 21:13
8F:→ Ianthegood:5'没有dT给你做阿 race是在这个时候才好用 10/28 01:10
9F:→ Ianthegood:还有是要放大total cDNA的时候两边都有adaptor比较方便 10/28 01:11