※ 引述《kobeiloveyou (我超強暴)》之銘言： : 大家好 : 請問PCR試劑 : sterile distilled water、dNTPs、PCR buffer、forward primer、reverse primer : 可以先加好 儲存在-20度嗎? 隔天再加 taq polymerase、template : 還有 : 每次在加試劑時 都很怕汙染到 所以每加完一個PCR tube 就會換一個tip : 再去吸相同試劑 加下一個 PCR tube : 請問試劑會不會很容易汙染阿? : 謝謝大家 你列出的藥劑含taq，都可以配成mix存在-20 效期都可以到一年以上 但是要加抗凍劑(e.g. > 5% glycerol)或是PCR additives(e.g. trehalose)， 增加taq和dNTP的安定性 另外你說的換TIP問題 有兩個考量的地方 第一個是如果你的PCR TUBE裡面已經有TEMPLATE了， 那最後是每加一管就換一個TIP，以防止交叉污染發生 第二個比較重要的點是 如果你加完一管就換一個TIP 很可能每管加的PREMIX量會有些微誤差(因為TIP會沾黏PREMIX) 在某些很敏感的實驗中(e.g. Q-PCR) 會影到到結果判讀 所以最好的作法是先將tip在premix中吸排幾下，讓tip先沾黏一些premix再開始分裝 比較不會有pipetting error --

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