※ 引述《kobeiloveyou (我超强暴)》之铭言： : 大家好 : 请问PCR试剂 : sterile distilled water、dNTPs、PCR buffer、forward primer、reverse primer : 可以先加好 储存在-20度吗? 隔天再加 taq polymerase、template : 还有 : 每次在加试剂时 都很怕污染到 所以每加完一个PCR tube 就会换一个tip : 再去吸相同试剂 加下一个 PCR tube : 请问试剂会不会很容易污染阿? : 谢谢大家 你列出的药剂含taq，都可以配成mix存在-20 效期都可以到一年以上 但是要加抗冻剂(e.g. > 5% glycerol)或是PCR additives(e.g. trehalose)， 增加taq和dNTP的安定性 另外你说的换TIP问题 有两个考量的地方 第一个是如果你的PCR TUBE里面已经有TEMPLATE了， 那最後是每加一管就换一个TIP，以防止交叉污染发生 第二个比较重要的点是 如果你加完一管就换一个TIP 很可能每管加的PREMIX量会有些微误差(因为TIP会沾黏PREMIX) 在某些很敏感的实验中(e.g. Q-PCR) 会影到到结果判读 所以最好的作法是先将tip在premix中吸排几下，让tip先沾黏一些premix再开始分装 比较不会有pipetting error --

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