作者spirithorse (咩)
看板Biotech
標題[方法]細胞培養代數問題??
時間Fri Oct 14 11:33:58 2011
以前是做myoblast (C2C12) 為了不要讓細胞代數太多
所以只要解凍後細胞夠多就直接種下去做實驗
現在換到新LAB做癌細胞(Huh 7)
實驗室習慣解凍後要繼代三次,讓細胞比較stable
(學姐說是要讓細胞產生應有的function需要一段時間)
因為我不想讓細胞代數太多,所以只要做完實驗就把細胞收起來
導致每次要開始culture時就會拖個一星期
我本來是想,細胞大約8小時分裂一次,有需要繼代到快一周來讓他stable嗎?
(碩班老師是覺得癌細胞就像雜草一樣...沒那麼嚴格)
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◆ From: 211.76.175.170
※ 編輯: spirithorse 來自: 211.76.175.170 (10/14 11:34)
1F：推 vancent:沒必要 10/14 11:43
2F：推 captdavince:我的看法是....實驗室的protocol不要亂改.... 10/14 11:50
3F：→ captdavince:或許有對有錯..但是.不要搞到一個實驗室裡有好幾種方 10/14 11:50
4F：→ captdavince:法.... 10/14 11:50
5F：推 FireHell:不需要，繼代一次即可。我倒覺得，不好的protocol要盡快 10/15 01:55
6F：→ FireHell:修正 10/15 01:56
7F：推 FireHell:你學姐的意思應該是三個doubling time，當然也有可能是會 10/15 01:59
8F：→ FireHell:錯意了 10/15 01:59
9F：→ blence:如果細胞八小時分裂一次,你平常用1:100繼代嗎？ 10/15 11:39
10F：→ blence:ATCC上不少癌細胞都是三天1:2~4繼代,一星期並不算久 10/15 11:42
To blence: 不好意思,為以前養C2C12 每次trypsin都保持不要讓細胞互相貼到就好
所以我不懂你說的"1:100或1:2-4繼代的意思"
※ 編輯: spirithorse 來自: 125.224.235.45 (10/15 13:57)
11F：推 conective:就是一盤細胞分兩盤到分四盤繼代的意思 10/16 10:42
12F：推 windyflyer:Huh7是沒聽過..我們實驗室Huh7沒聽過要養到三代 養過一 10/22 02:55
13F：→ windyflyer:代就可以用了耶..是replicon細胞才要養到三代 10/22 02:56