作者spirithorse (咩)
看板Biotech
标题[方法]细胞培养代数问题??
时间Fri Oct 14 11:33:58 2011
以前是做myoblast (C2C12) 为了不要让细胞代数太多
所以只要解冻後细胞够多就直接种下去做实验
现在换到新LAB做癌细胞(Huh 7)
实验室习惯解冻後要继代三次,让细胞比较stable
(学姐说是要让细胞产生应有的function需要一段时间)
因为我不想让细胞代数太多,所以只要做完实验就把细胞收起来
导致每次要开始culture时就会拖个一星期
我本来是想,细胞大约8小时分裂一次,有需要继代到快一周来让他stable吗?
(硕班老师是觉得癌细胞就像杂草一样...没那麽严格)
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◆ From: 211.76.175.170
※ 编辑: spirithorse 来自: 211.76.175.170 (10/14 11:34)
1F：推 vancent:没必要 10/14 11:43
2F：推 captdavince:我的看法是....实验室的protocol不要乱改.... 10/14 11:50
3F：→ captdavince:或许有对有错..但是.不要搞到一个实验室里有好几种方 10/14 11:50
4F：→ captdavince:法.... 10/14 11:50
5F：推 FireHell:不需要，继代一次即可。我倒觉得，不好的protocol要尽快 10/15 01:55
6F：→ FireHell:修正 10/15 01:56
7F：推 FireHell:你学姐的意思应该是三个doubling time，当然也有可能是会 10/15 01:59
8F：→ FireHell:错意了 10/15 01:59
9F：→ blence:如果细胞八小时分裂一次,你平常用1:100继代吗？ 10/15 11:39
10F：→ blence:ATCC上不少癌细胞都是三天1:2~4继代,一星期并不算久 10/15 11:42
To blence: 不好意思,为以前养C2C12 每次trypsin都保持不要让细胞互相贴到就好
所以我不懂你说的"1:100或1:2-4继代的意思"
※ 编辑: spirithorse 来自: 125.224.235.45 (10/15 13:57)
11F：推 conective:就是一盘细胞分两盘到分四盘继代的意思 10/16 10:42
12F：推 windyflyer:Huh7是没听过..我们实验室Huh7没听过要养到三代 养过一 10/22 02:55
13F：→ windyflyer:代就可以用了耶..是replicon细胞才要养到三代 10/22 02:56