作者CrossZippo (狼凰慈威)
看板Biotech
標題[求救] 如何利用抗體辨認純醣鏈?
時間Fri Oct 7 19:48:14 2011
各位先進好，小弟想來求救一下，
目前實驗室需要以一支自備抗體辨認 Sialyl Lewis X，
http://en.wikipedia.org/wiki/Sialyl_lewis_x
由於他是一個四醣的小分子，
已使用過 ELISA，但醣 coat 不上去，
也用過 DAS-ELISA，但效果不彰，推測可能是分子太小，
兩個不同一抗辨認位置可能有重疊，甚至根本就相同，
所以導致第二位一抗無法結合上去。
用過 Dot-Blot，但也失敗，推測可能醣分子太小穿過 membrane，
membrane 我們用過 0.45um 以及 0.025um 的結果都一樣失敗。
左思右想苦無對策，
不知是否有人有以抗體辨認小分子純醣鏈的經驗?
或者是耳聞過有哪些方法的?
感謝!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 203.71.94.31
1F：推 intotheman:去找看看有沒有商業化接biotin的 直接用avidin固定 10/07 21:45
2F：→ CrossZippo:1F是指將avidin coating在底盤上 再將接有biotin的SLeX 10/08 02:12
3F：→ CrossZippo:醣鏈加入與之結合嗎 但醣鏈接上biotin 如此一來改變了 10/08 02:14
4F：→ CrossZippo:結構 不知道這支自製抗體是否還能夠辨認 10/08 02:15
5F：→ intotheman:通常糖修飾會在還原端 理論上前面三個糖沒被破壞 10/08 10:31
6F：→ intotheman:抗體就有機會可以辨識 你可以去查一下期刊 10/08 10:31
7F：→ CrossZippo:好的 那看起來這個方法不錯 而且如果能自己在實驗室進 10/09 15:09
8F：→ CrossZippo:行biotinylation 可能會更加方便 感謝! 10/09 15:10