作者CrossZippo (狼凰慈威)
看板Biotech
标题[求救] 如何利用抗体辨认纯醣链?
时间Fri Oct 7 19:48:14 2011
各位先进好，小弟想来求救一下，
目前实验室需要以一支自备抗体辨认 Sialyl Lewis X，
http://en.wikipedia.org/wiki/Sialyl_lewis_x
由於他是一个四醣的小分子，
已使用过 ELISA，但醣 coat 不上去，
也用过 DAS-ELISA，但效果不彰，推测可能是分子太小，
两个不同一抗辨认位置可能有重叠，甚至根本就相同，
所以导致第二位一抗无法结合上去。
用过 Dot-Blot，但也失败，推测可能醣分子太小穿过 membrane，
membrane 我们用过 0.45um 以及 0.025um 的结果都一样失败。
左思右想苦无对策，
不知是否有人有以抗体辨认小分子纯醣链的经验?
或者是耳闻过有哪些方法的?
感谢!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 203.71.94.31
1F：推 intotheman:去找看看有没有商业化接biotin的 直接用avidin固定 10/07 21:45
2F：→ CrossZippo:1F是指将avidin coating在底盘上 再将接有biotin的SLeX 10/08 02:12
3F：→ CrossZippo:醣链加入与之结合吗 但醣链接上biotin 如此一来改变了 10/08 02:14
4F：→ CrossZippo:结构 不知道这支自制抗体是否还能够辨认 10/08 02:15
5F：→ intotheman:通常糖修饰会在还原端 理论上前面三个糖没被破坏 10/08 10:31
6F：→ intotheman:抗体就有机会可以辨识 你可以去查一下期刊 10/08 10:31
7F：→ CrossZippo:好的 那看起来这个方法不错 而且如果能自己在实验室进 10/09 15:09
8F：→ CrossZippo:行biotinylation 可能会更加方便 感谢! 10/09 15:10