作者lookfor0326 (find)
看板Biotech
標題[求救] 磷酸化蛋白
時間Fri Sep 9 18:41:43 2011
不好意思...
想請教一個小小的問題
由於目前的實驗是以藥物測試蛋白質的改變
但WB結果顯示target蛋白質並無減少或增多的情況，
於是想要去探討有沒有可能會是影響到target protein磷酸化，
但因為手邊沒有target protein 磷酸化抗體可以用來測試這個問題，
因此想要請教大家:
檢測這類的問題(磷酸化蛋白)是不是只能靠抗體才能解決了。
謝謝~
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.70.139
1F：推 Rarelay:point mutation 可以先試試，就不需要一開始打抗體... 09/09 23:36
2F：→ lookfor0326:R大 謝謝您.想請教您指的protein mutation? 09/10 16:13
3F：推 HEK293:是point mutation...不是protein... 09/10 17:57
4F：推 abliou:用p32不能解決嗎 09/10 23:14
5F：→ blence:1樓的是探討磷酸化位置的功能,完全無法探討藥物造成的變化 09/10 23:26
6F：→ blence:4樓的方法需要in vivo labeling及IP-WB,前述很麻煩 09/10 23:32
7F：推 abliou:不過沒有磷酸化抗體我也只能想到這樣了 樓上有更好的辦法? 09/11 00:05
8F：→ yuasa:自己生產磷酸化的抗體~(誤) 09/11 00:16
9F：→ blence:原po的重點是drug,用unknown drug測試unknown phospho是鬼 09/11 00:18
10F：→ blence:打牆,所以應該只是還沒買p-Ab,而不是沒有p-Ab可買吧 09/11 00:20
11F：→ blence:繞遠路的方法是看paper瞭解蛋白質磷酸化的下游變化有無顯現 09/11 00:26
12F：→ blence:畢竟如果下游訊號或生理變化沒差異,磷酸化有改變也是無趣 09/11 00:29
13F：推 icome:這時候就需要人脈了 想辦法跟人借一點抗體XD 09/11 16:32
14F：推 Fourfish:打mass看分子量或許也是個方法 09/12 10:56