作者lookfor0326 (find)
看板Biotech
标题[求救] 磷酸化蛋白
时间Fri Sep 9 18:41:43 2011
不好意思...
想请教一个小小的问题
由於目前的实验是以药物测试蛋白质的改变
但WB结果显示target蛋白质并无减少或增多的情况，
於是想要去探讨有没有可能会是影响到target protein磷酸化，
但因为手边没有target protein 磷酸化抗体可以用来测试这个问题，
因此想要请教大家:
检测这类的问题(磷酸化蛋白)是不是只能靠抗体才能解决了。
谢谢~
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.70.139
1F：推 Rarelay:point mutation 可以先试试，就不需要一开始打抗体... 09/09 23:36
2F：→ lookfor0326:R大 谢谢您.想请教您指的protein mutation? 09/10 16:13
3F：推 HEK293:是point mutation...不是protein... 09/10 17:57
4F：推 abliou:用p32不能解决吗 09/10 23:14
5F：→ blence:1楼的是探讨磷酸化位置的功能,完全无法探讨药物造成的变化 09/10 23:26
6F：→ blence:4楼的方法需要in vivo labeling及IP-WB,前述很麻烦 09/10 23:32
7F：推 abliou:不过没有磷酸化抗体我也只能想到这样了 楼上有更好的办法? 09/11 00:05
8F：→ yuasa:自己生产磷酸化的抗体~(误) 09/11 00:16
9F：→ blence:原po的重点是drug,用unknown drug测试unknown phospho是鬼 09/11 00:18
10F：→ blence:打墙,所以应该只是还没买p-Ab,而不是没有p-Ab可买吧 09/11 00:20
11F：→ blence:绕远路的方法是看paper了解蛋白质磷酸化的下游变化有无显现 09/11 00:26
12F：→ blence:毕竟如果下游讯号或生理变化没差异,磷酸化有改变也是无趣 09/11 00:29
13F：推 icome:这时候就需要人脉了 想办法跟人借一点抗体XD 09/11 16:32
14F：推 Fourfish:打mass看分子量或许也是个方法 09/12 10:56