作者kiko07 (kiko)
看板Biotech
標題[討論] 跑flow cell surface marker至於冰上否
時間Sun Sep 4 23:01:25 2011
請教各位大大
一直對於收下來的細胞作flow時是否至於冰上感困擾
目前想法是：
１ 進行ａｐｏｐｔｏｓｉｓ相關分析時→冰上ｏｋ
２ 進行ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｒｋｅｒ時
會進行固定與破細胞→因此皆需置於冰上？這樣的觀念對嗎
３ 進行ｃｅｌｌ ｍａｒｋｅｒ染色（普通表面受器染色）時
因為細胞從３７度培養箱收下來 應該屬於活細胞狀態
所以所進行之染色步驟應避免冰上 以免細胞死亡
→我這樣的觀念是對的嗎 但我看很多ｐａｐｅｒ或ｐｒｏｔｏｃｌ
都是在４度ｃ的環境下進行 包含用冰的ＰＢＳ ｗａｓｈ
有些則是沒有特別說明
另外 使用的抗體ｄａｔａ ｓｈｅｅｔ也不會特別說明應在何種溫度下進行
請各位不吝指教 謝謝大家
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◆ From: 219.84.251.10
1F：推 Realthugz:有些人會放冰上 真的就是放在碎冰表面 非插到冰裡 09/04 23:24
2F：→ Realthugz:插到冰裡不會怎樣 primary cell都放冰上了 沒這麼脆弱 09/04 23:25
3F：→ Realthugz:說實在的細胞死亡跟養得好不好比較有關係 尤其cell line 09/04 23:26
4F：推 bennie:放冰上是為了降低溫，並使蛋白質停止反映，cell cycle stop 09/05 20:38