作者kiko07 (kiko)
看板Biotech
标题[讨论] 跑flow cell surface marker至於冰上否
时间Sun Sep 4 23:01:25 2011
请教各位大大
一直对於收下来的细胞作flow时是否至於冰上感困扰
目前想法是：
１ 进行ａｐｏｐｔｏｓｉｓ相关分析时→冰上ｏｋ
２ 进行ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｒｋｅｒ时
会进行固定与破细胞→因此皆需置於冰上？这样的观念对吗
３ 进行ｃｅｌｌ ｍａｒｋｅｒ染色（普通表面受器染色）时
因为细胞从３７度培养箱收下来 应该属於活细胞状态
所以所进行之染色步骤应避免冰上 以免细胞死亡
→我这样的观念是对的吗 但我看很多ｐａｐｅｒ或ｐｒｏｔｏｃｌ
都是在４度ｃ的环境下进行 包含用冰的ＰＢＳ ｗａｓｈ
有些则是没有特别说明
另外 使用的抗体ｄａｔａ ｓｈｅｅｔ也不会特别说明应在何种温度下进行
请各位不吝指教 谢谢大家
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 219.84.251.10
1F：推 Realthugz:有些人会放冰上 真的就是放在碎冰表面 非插到冰里 09/04 23:24
2F：→ Realthugz:插到冰里不会怎样 primary cell都放冰上了 没这麽脆弱 09/04 23:25
3F：→ Realthugz:说实在的细胞死亡跟养得好不好比较有关系 尤其cell line 09/04 23:26
4F：推 bennie:放冰上是为了降低温，并使蛋白质停止反映，cell cycle stop 09/05 20:38