作者premire (熱騰騰的泡麵)
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標題[討論] 蛋白質定量
時間Wed Aug 31 18:14:00 2011
最近小弟在用類似Bradford method進行protein 定量
是利用試劑在偏鹼性環境下解離帶負電荷 與帶正電的基團如
lysine histidine結合後形成偏綠色產物 測UV660
目前碰到的問題是 假如蛋白質denature變成一級結構或是分解成氨基酸後
喪失了三級或是四級結構 那麼利用bradford 還是可以有相同的定量結果嗎？
亦或是bradford必須要在蛋白質構型完整情況下才能與之結合產生穩定產物呢？
如果知道可否為小弟解惑 感激不盡！
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 210.60.122.10
1F：推 shenhsu:還是可以有相同的定量結果 08/31 19:06
2F：→ shenhsu:實驗室就是以TCA(強酸)沉澱蛋白質後再定量 08/31 19:07
3F：推 CErline:TCA後很難回溶吧 08/31 19:32
4F：→ premire:所以假如要分辨是否分解有沒有專一性的測定方法呢 08/31 21:32
5F：→ soom:那不就是要測活性了嗎？ 09/01 13:52
6F：→ shenhsu:C大~ 我們沉澱完會再用0.1N NaOH回溶 再定量 感覺還ok 09/01 16:36
7F：推 cocodo:如果是我會用巴斯德滅菌混搭間歇滅菌試看看 09/01 22:21
8F：→ cocodo:或著丟到鈷六十小房間去.... 09/01 22:23
9F：→ cocodo:回錯文請無視..XD 09/01 22:24