作者premire (热腾腾的泡面)
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标题[讨论] 蛋白质定量
时间Wed Aug 31 18:14:00 2011
最近小弟在用类似Bradford method进行protein 定量
是利用试剂在偏硷性环境下解离带负电荷 与带正电的基团如
lysine histidine结合後形成偏绿色产物 测UV660
目前碰到的问题是 假如蛋白质denature变成一级结构或是分解成氨基酸後
丧失了三级或是四级结构 那麽利用bradford 还是可以有相同的定量结果吗？
亦或是bradford必须要在蛋白质构型完整情况下才能与之结合产生稳定产物呢？
如果知道可否为小弟解惑 感激不尽！
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 210.60.122.10
1F：推 shenhsu:还是可以有相同的定量结果 08/31 19:06
2F：→ shenhsu:实验室就是以TCA(强酸)沉淀蛋白质後再定量 08/31 19:07
3F：推 CErline:TCA後很难回溶吧 08/31 19:32
4F：→ premire:所以假如要分辨是否分解有没有专一性的测定方法呢 08/31 21:32
5F：→ soom:那不就是要测活性了吗？ 09/01 13:52
6F：→ shenhsu:C大~ 我们沉淀完会再用0.1N NaOH回溶 再定量 感觉还ok 09/01 16:36
7F：推 cocodo:如果是我会用巴斯德灭菌混搭间歇灭菌试看看 09/01 22:21
8F：→ cocodo:或着丢到钴六十小房间去.... 09/01 22:23
9F：→ cocodo:回错文请无视..XD 09/01 22:24