作者jbcc (勇伯)
看板Biotech
標題[求救] 抽pancreas的RNA
時間Tue Aug 30 13:27:14 2011
想請教學長姐們，有沒有人抽過mouse pancreas的RNA？
可以給我一些建議
我們家使用的方法是將pancreas tissue取下來之後
分別浸泡在RNA later中，以及放入液態氮保存
之後再利用TRIzol以及Geneaid的Kit去抽RNA
兩種保存方法的tissue我都有拿來做實驗
抽完的RNA經由nanodrop測出來的濃度也都還不錯( > 1μg/μl)
260/280的值也都在 2 左右
但是經過跑膠確認後卻發現RNA都degrade
而作為postive control的liver RNA可以清楚的看到28S、18S的band
所以想請教有經驗的學長姐，看看有沒有什麼方法可以改善抽出來的quality
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◆ From: 140.116.253.121
1F：推 Yargue:tissue取下後立刻丟進液態氮, 等完全結凍之後再丟到epp保存 08/31 19:09
2F：→ Yargue:我試過放-80兩個星期之後再拿出來抽, 也還不會DEGRADE 08/31 19:10
3F：→ Yargue:還有一個重點是, pancreas只要取一點點出來抽, 就可以得到 08/31 19:11
4F：→ Yargue:足夠的RNA(我的比例是30ug+1ml Trizol) 08/31 19:12
5F：→ Yargue:當TRIZOL比例相對少的時候,可能就沒辦法完全抑制掉pancreas 08/31 19:13
6F：→ Yargue:內所含的酵素 08/31 19:14
7F：推 Yargue:講錯了 是30mg + 1ml Trizol, 不是ug 08/31 19:19
8F：推 birdddd:你也可以先將tissue跟TRI加好均質再拿去冰 小的tissue我會 09/01 22:21
9F：→ birdddd:這麼做 09/01 22:21