作者jbcc (勇伯)
看板Biotech
标题[求救] 抽pancreas的RNA
时间Tue Aug 30 13:27:14 2011
想请教学长姐们，有没有人抽过mouse pancreas的RNA？
可以给我一些建议
我们家使用的方法是将pancreas tissue取下来之後
分别浸泡在RNA later中，以及放入液态氮保存
之後再利用TRIzol以及Geneaid的Kit去抽RNA
两种保存方法的tissue我都有拿来做实验
抽完的RNA经由nanodrop测出来的浓度也都还不错( > 1μg/μl)
260/280的值也都在 2 左右
但是经过跑胶确认後却发现RNA都degrade
而作为postive control的liver RNA可以清楚的看到28S、18S的band
所以想请教有经验的学长姐，看看有没有什麽方法可以改善抽出来的quality
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.253.121
1F：推 Yargue:tissue取下後立刻丢进液态氮, 等完全结冻之後再丢到epp保存 08/31 19:09
2F：→ Yargue:我试过放-80两个星期之後再拿出来抽, 也还不会DEGRADE 08/31 19:10
3F：→ Yargue:还有一个重点是, pancreas只要取一点点出来抽, 就可以得到 08/31 19:11
4F：→ Yargue:足够的RNA(我的比例是30ug+1ml Trizol) 08/31 19:12
5F：→ Yargue:当TRIZOL比例相对少的时候,可能就没办法完全抑制掉pancreas 08/31 19:13
6F：→ Yargue:内所含的酵素 08/31 19:14
7F：推 Yargue:讲错了 是30mg + 1ml Trizol, 不是ug 08/31 19:19
8F：推 birdddd:你也可以先将tissue跟TRI加好均质再拿去冰 小的tissue我会 09/01 22:21
9F：→ birdddd:这麽做 09/01 22:21