作者sdgaejr118 (~夜裡的恆星~)
看板Biotech
標題[求救] 用LPS誘導RAW264.7產生NO
時間Tue Aug 23 01:17:55 2011
各位大大好
小妹我已爬相關文章了
發現不少人在養RAW264.7 cell
在養的方面我是沒問題
有問題的是在測NO方面
當我種細胞後培養24小時即做加藥處理
Control組是DMSO+LPS(因為Sample是溶於DMSO的)
背景組是DMSO+PBS(因為LPS是溶於PBS當中)
培養24小時後
以Griess reagent測得NO的含量
但每次Control測出來的數值都忽高忽低
高可以高到24uM/mL
小可以小到剩3uM/mL
但背景組的值是很固定的 都在1.多附近
實驗手法、細胞培養時間、加藥處理時間、還有試劑作用時間都是固定
但偏偏測出來的Control組的值卻忽高忽低
一直抓不到問題點
LPS溶液是儲藏於-20C 這應該沒有關係吧?
Griess reagent 是自己配的 並且冷藏
每次測Blank時數據大概是0.044~0.049
這應該代表試劑沒壞掉吧?!
是加試劑時一定要在室溫25度嗎?
還是其他地方需要注意的呢?
還請有經驗的大大多多指教
謝謝唷!
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◆ From: 118.170.73.31
1F：→ qiuqiuever:細胞狀況要先維持好 08/24 02:06
2F：→ sdgaejr118:有啊! 細胞都很正常呀! 08/24 22:30
3F：→ qiuqiuever:我們自己做的時候，從數完到處理藥物的時間都固定，還 08/24 23:39
4F：→ qiuqiuever:有細胞數都固定。如果這邊都條件都不變，那可能要看看 08/24 23:40
5F：→ qiuqiuever:是不是試劑該重新配了 08/24 23:41
6F：→ sdgaejr118:那個試劑通常配完冷藏可保存多久呢? 08/25 16:12
7F：→ sdgaejr118:可是Blank的值並沒有亂跳耶! 這樣是試劑有問題嗎? 08/25 16:13