作者sdgaejr118 (~夜里的恒星~)
看板Biotech
标题[求救] 用LPS诱导RAW264.7产生NO
时间Tue Aug 23 01:17:55 2011
各位大大好
小妹我已爬相关文章了
发现不少人在养RAW264.7 cell
在养的方面我是没问题
有问题的是在测NO方面
当我种细胞後培养24小时即做加药处理
Control组是DMSO+LPS(因为Sample是溶於DMSO的)
背景组是DMSO+PBS(因为LPS是溶於PBS当中)
培养24小时後
以Griess reagent测得NO的含量
但每次Control测出来的数值都忽高忽低
高可以高到24uM/mL
小可以小到剩3uM/mL
但背景组的值是很固定的 都在1.多附近
实验手法、细胞培养时间、加药处理时间、还有试剂作用时间都是固定
但偏偏测出来的Control组的值却忽高忽低
一直抓不到问题点
LPS溶液是储藏於-20C 这应该没有关系吧?
Griess reagent 是自己配的 并且冷藏
每次测Blank时数据大概是0.044~0.049
这应该代表试剂没坏掉吧?!
是加试剂时一定要在室温25度吗?
还是其他地方需要注意的呢?
还请有经验的大大多多指教
谢谢唷!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 118.170.73.31
1F：→ qiuqiuever:细胞状况要先维持好 08/24 02:06
2F：→ sdgaejr118:有啊! 细胞都很正常呀! 08/24 22:30
3F：→ qiuqiuever:我们自己做的时候，从数完到处理药物的时间都固定，还 08/24 23:39
4F：→ qiuqiuever:有细胞数都固定。如果这边都条件都不变，那可能要看看 08/24 23:40
5F：→ qiuqiuever:是不是试剂该重新配了 08/24 23:41
6F：→ sdgaejr118:那个试剂通常配完冷藏可保存多久呢? 08/25 16:12
7F：→ sdgaejr118:可是Blank的值并没有乱跳耶! 这样是试剂有问题吗? 08/25 16:13