作者mournermind (阿矇)
看板Biotech
標題[求救] 跪求E.coli strain: BL21-codon plus(DE3)-RP
時間Sun Aug 14 23:59:18 2011
我是交大的學生
最近在表現一個分子量100KD多的蛋白
我選用pET30b做vector 表現量卻不高 (IN Novablue(DE3) & BL21 (DE3))
由於表現的基因GC％很高 因此懷疑可能因此造成表現量較低
希望版上哪位先進有
E.coli strain: BL21-codon plus(DE3)-RP
或是
E.coli strain: BL21-codon plus(DE3)-RIPL
或是
Rosetta 系列的菌（目的是想補充稀有密碼子,目前最想要這隻...）都可以
的菌株....可以向您要...我可以買飲料或是中晚餐交換QQ
如果再比較遠的地方我可以付郵寄費用....謝謝,....
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.113.173.247
1F：推 aggaci:我有我在台南...既然妳在新竹我知道清大有誰有.. 08/15 01:10
2F：→ mournermind:Rosetta系列的菌也可以...目的是想補充稀有密碼子.... 08/15 01:15
3F：→ mournermind:樓上版大能寄信跟我說嗎QQ謝謝！ 08/15 01:15
※ 編輯: mournermind 來自: 140.113.173.247 (08/15 01:16)
※ 編輯: mournermind 來自: 140.113.173.247 (08/15 01:24)
4F：推 silverberry:分子量很大，真的確定是 rare codon 的關係嗎? 08/16 11:00
6F：→ silverberry:如果真的有缺密碼子再看要哪個 strain 08/16 11:02
7F：→ silverberry:我自己用過 rosetta 和 origami 那些系列。 08/16 11:03
8F：→ silverberry:因為菌裡做了很多 modify, 反而用起來比酵母菌難用。 08/16 11:04
9F：推 silverberry:ArcticExpress系列做inclusion body還蠻不錯的。 08/16 11:07
10F：推 icome:應該是太大了 之前實驗室有人做過 800aa就幾乎做不出來 08/16 23:00
11F：→ icome:大部分E.coli蛋白只有200-300aa 太長它會罷工XD 08/16 23:03
12F：→ mournermind:因為我用rare codon calculater比對過 似乎rare codon 08/17 00:19
13F：→ mournermind:有點多... 08/17 00:19
14F：→ mournermind:謝謝大家的意見!我在跟老師討論看看! 08/17 00:19
15F：→ mournermind:謝謝icome 不過我不敢隨意捷短因為這是要做抗體的 08/17 00:32
16F：→ mournermind:蛋白...我怕到時候表現出來的不是native蛋白展露在外 08/17 00:33
17F：→ mournermind:的就糟糕了...而且沒有結構可以比對QQ所以沒法猜... 08/17 00:33