作者mournermind (阿蒙)
看板Biotech
标题[求救] 跪求E.coli strain: BL21-codon plus(DE3)-RP
时间Sun Aug 14 23:59:18 2011
我是交大的学生
最近在表现一个分子量100KD多的蛋白
我选用pET30b做vector 表现量却不高 (IN Novablue(DE3) & BL21 (DE3))
由於表现的基因GC％很高 因此怀疑可能因此造成表现量较低
希望版上哪位先进有
E.coli strain: BL21-codon plus(DE3)-RP
或是
E.coli strain: BL21-codon plus(DE3)-RIPL
或是
Rosetta 系列的菌（目的是想补充稀有密码子,目前最想要这只...）都可以
的菌株....可以向您要...我可以买饮料或是中晚餐交换QQ
如果再比较远的地方我可以付邮寄费用....谢谢,....
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.113.173.247
1F：推 aggaci:我有我在台南...既然你在新竹我知道清大有谁有.. 08/15 01:10
2F：→ mournermind:Rosetta系列的菌也可以...目的是想补充稀有密码子.... 08/15 01:15
3F：→ mournermind:楼上版大能寄信跟我说吗QQ谢谢！ 08/15 01:15
※ 编辑: mournermind 来自: 140.113.173.247 (08/15 01:16)
※ 编辑: mournermind 来自: 140.113.173.247 (08/15 01:24)
4F：推 silverberry:分子量很大，真的确定是 rare codon 的关系吗? 08/16 11:00
6F：→ silverberry:如果真的有缺密码子再看要哪个 strain 08/16 11:02
7F：→ silverberry:我自己用过 rosetta 和 origami 那些系列。 08/16 11:03
8F：→ silverberry:因为菌里做了很多 modify, 反而用起来比酵母菌难用。 08/16 11:04
9F：推 silverberry:ArcticExpress系列做inclusion body还蛮不错的。 08/16 11:07
10F：推 icome:应该是太大了 之前实验室有人做过 800aa就几乎做不出来 08/16 23:00
11F：→ icome:大部分E.coli蛋白只有200-300aa 太长它会罢工XD 08/16 23:03
12F：→ mournermind:因为我用rare codon calculater比对过 似乎rare codon 08/17 00:19
13F：→ mournermind:有点多... 08/17 00:19
14F：→ mournermind:谢谢大家的意见!我在跟老师讨论看看! 08/17 00:19
15F：→ mournermind:谢谢icome 不过我不敢随意捷短因为这是要做抗体的 08/17 00:32
16F：→ mournermind:蛋白...我怕到时候表现出来的不是native蛋白展露在外 08/17 00:33
17F：→ mournermind:的就糟糕了...而且没有结构可以比对QQ所以没法猜... 08/17 00:33