這個問題困擾我蠻長一段時間了...我做plaque assay多於一盤時，就會一次只處理一盤 （目前最多只有做到三盤）但時間掌握好像有點問題，細胞總是會掉下來 1.先將第一盤medium移除，以1x含Ca和Mg的PBS wash 2.搖晃後移除PBS，用顯微鏡觀察細胞有無掉落 3.沒掉落，再加PBS wash第二次 此時先讓細胞泡在PBS中，去處理第二盤（助教操作時曾讓細胞泡在PBS中，沒事） 4.將第二盤medium移除，以1x含Ca和Mg的PBS wash 5.搖晃後移除PBS，用顯微鏡觀察細胞有無掉落 6.沒掉落，再加PBS wash第二次 7.將第一盤的PBS移除，用顯微鏡觀察 此時，靠well 左側的細胞有的皺縮有的掉落了一大片（通常是12 well左邊兩排 ） 8.把藥物和病毒下到第一盤cell 9.將第二盤的PBS移除，用顯微鏡觀察 也發生了同樣的掉落情形 之前大概都是這樣，這次更嚴重，不只兩排掉，幾乎所有well都掉...不過這次因為 時間緣故，細胞數沒有之前滿我就下了，大概是85%滿|||| 應該要接近95~100%滿，但細胞還不到擠的程度下病毒 但老闆說PBS不可能造成這樣的狀況（還沒跟她說滿度問題） 而且就算會掉，我掉的方向也和她以前看過的不同邊@@" （我是左手略抬高12 well，讓PBS流到右側後吸乾，此時最左兩排細胞掉落的地方 不受PBS的覆蓋） 我想到的只有細胞數和PBS的問題="= 想請問細胞如果是全滿的，又不讓它泡在PBS中（加入搖晃後立刻移除，不吸得很乾， 表面看起來有水光）是否應該可以解除細胞掉落情形？ 還是只要是全滿，就算泡在PBS中（顯微鏡觀察一盤頂多三分鐘），應該也不會有影響？ 煩請有經驗的板友幫我想想＆解答吧，一直浪費耗材空做不是辦法啊>"< --

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