这个问题困扰我蛮长一段时间了...我做plaque assay多於一盘时，就会一次只处理一盘 （目前最多只有做到三盘）但时间掌握好像有点问题，细胞总是会掉下来 1.先将第一盘medium移除，以1x含Ca和Mg的PBS wash 2.摇晃後移除PBS，用显微镜观察细胞有无掉落 3.没掉落，再加PBS wash第二次 此时先让细胞泡在PBS中，去处理第二盘（助教操作时曾让细胞泡在PBS中，没事） 4.将第二盘medium移除，以1x含Ca和Mg的PBS wash 5.摇晃後移除PBS，用显微镜观察细胞有无掉落 6.没掉落，再加PBS wash第二次 7.将第一盘的PBS移除，用显微镜观察 此时，靠well 左侧的细胞有的皱缩有的掉落了一大片（通常是12 well左边两排 ） 8.把药物和病毒下到第一盘cell 9.将第二盘的PBS移除，用显微镜观察 也发生了同样的掉落情形 之前大概都是这样，这次更严重，不只两排掉，几乎所有well都掉...不过这次因为 时间缘故，细胞数没有之前满我就下了，大概是85%满|||| 应该要接近95~100%满，但细胞还不到挤的程度下病毒 但老板说PBS不可能造成这样的状况（还没跟她说满度问题） 而且就算会掉，我掉的方向也和她以前看过的不同边@@" （我是左手略抬高12 well，让PBS流到右侧後吸乾，此时最左两排细胞掉落的地方 不受PBS的覆盖） 我想到的只有细胞数和PBS的问题="= 想请问细胞如果是全满的，又不让它泡在PBS中（加入摇晃後立刻移除，不吸得很乾， 表面看起来有水光）是否应该可以解除细胞掉落情形？ 还是只要是全满，就算泡在PBS中（显微镜观察一盘顶多三分钟），应该也不会有影响？ 烦请有经验的板友帮我想想＆解答吧，一直浪费耗材空做不是办法啊>"< --

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